SARS-Cov-2 RNA උතුරු ඉතාලියේ Bergamo හි අංශු මත හමු විය: පළමු මූලික සාක්ෂිය

SARS-CoV-2 වෛරසය හේතුවෙන් - COVID-19 රෝගය ලෙස හඳුන්වන දරුණු උග්‍ර ශ්වසන සින්ඩ්‍රෝමය ශ්වසන ජල බිඳිති සහ සමීප සම්බන්ධතා හරහා පැතිරෙන බව හඳුනාගෙන ඇත.[1]මිනිස් සෞඛ්‍යයට අහිතකර බලපෑම් ඇති කරන බව දැනටමත් දන්නා අංශු ද්‍රව්‍යවල ඉහළ සාන්ද්‍රණයකින් සංලක්ෂිත ප්‍රදේශයක් වන ලොම්බාර්ඩි සහ පෝ නිම්නය (උතුරු ඉතාලිය) [2] හි COVID-19 හි බර අතිශයින් දරුණු විය.[3]අප්‍රේල් 12 වන දින ඉතාලිය සඳහා ලබා ගත හැකි ප්‍රාදේශීය සංඛ්‍යාලේඛනවලින් පෙනී යන්නේ දැනට ධනාත්මක පුද්ගලයින්ගෙන් 30% ක් පමණ තවමත් ලොම්බාර්ඩි හි ජීවත් වන බවයි (වසංගතයේ ආරම්භයේ සිට තහවුරු වූ සමස්ත සිද්ධීන් සලකා බැලුවහොත් 40% ක් පමණ), පසුව එමිලියා රොමග්නා (13.5%) , Piedmont (10.5%), සහ Veneto (10%).[2]Po Valley හි මෙම කලාප හතර ඉතාලියේ වාර්තා වන මුළු මරණ වලින් 80% ක් සහ දැඩි සත්කාර ඒකක ඇතුළත් කිරීම් වලින් 65% ක් වේ.[2]

Harvard School of Public Health විසින් සිදු කරන ලද පර්යේෂණයකින් එක්සත් ජනපදයේ COVID-19 හේතුවෙන් PM සාන්ද්‍රණය වැඩිවීම සහ මරණ අනුපාතිකය අතර සම්බන්ධයක් තහවුරු වන බව පෙනේ[4] පෙර සන්නිවේදනයන්හිදී, SARS-CoV-2 විය හැකි බවට අපි උපකල්පනය කර ඇත්තෙමු. ආසාදනය පැතිරීමේදී අංශු ද්‍රව්‍ය (PM) මත වෛරසය පැවතිය හැක,[5,6] දැනටමත් සාක්ෂි සහිතව
වෙනත් වෛරස් සඳහා ලබා ගත හැක.[7-15] කෙසේ වෙතත්, විශේෂයෙන්ම නාගරික පරිසරයන්හි වාතයෙන් සම්ප්‍රේෂණය වන PM ආශ්‍රිත ක්ෂුද්‍ර ජීවී ප්‍රශ්නය බොහෝ දුරට විමර්ශනයට භාජනය වී නොමැත, [16] සහ - දැනට - කිසිවෙකු තවමත් නිශ්චිතව ඉලක්ක කරගත් පර්යේෂණාත්මක අධ්‍යයනයන් සිදු කර නොමැත. PM මත SARS-CoV-2 ඇති බව තහවුරු කිරීම හෝ බැහැර කිරීම.
මෙහිදී, අපි පෙබරවාරි 21 සිට මාර්තු දක්වා අඛණ්ඩ සති 3ක කාලයක් විවිධ වායු සාම්පල දෙකක් සමඟ එකතු කරන ලද Bergamo පළාතේ කාර්මික අඩවියකින් එළිමහන්/වාතයෙන් ගෙන යන PM10 සාම්පල 34 PM10 මත සිදු කළ විශ්ලේෂණවල පළමු ප්‍රතිඵල අපි ඉදිරිපත් කරමු. 13 වැනි.
Pan et al විසින් විස්තර කරන ලද ක්‍රමවේදය අනුගමනය කරමින්.2019 දී (වාතයේ ඇති වෛරස් එකතු කිරීම, අංශු ප්‍රමාණය කිරීම සහ හඳුනා ගැනීම සඳහා),[17] PM සාම්පල EN12341 යොමු ක්‍රමයට අනුකූලව අඩු ග්‍රාවිමිතික වායු සාම්පලයක් (පැය 23 සඳහා 38.3 l/min) භාවිතා කරමින් ක්වාර්ට්ස් ෆයිබර් ෆිල්ටර මත එකතු කරන ලදී. :2014 PM10 නිරීක්ෂණය සඳහා.අංශු ද්‍රව්‍ය සාමාන්‍යයෙන් 99.9%ක් සහිත පෙරහන් මත සිරවී ඇතaerosol රඳවා තබා ගැනීම, නිසි ලෙස ගබඩා කර ට්‍රයිස්ටේ විශ්ව විද්‍යාලයේ ව්‍යවහාරික හා සංසන්දනාත්මක ප්‍රවේණි විද්‍යාවේ රසායනාගාරයට ලබා දීම.නියැදියේ "පාරිසරික" ස්වභාවය අනුව, අනුමාන වශයෙන් DNA පොලිමරේස් නිෂේධක වලින් පොහොසත්, අපි ෆිල්ටර වර්ගයට අනුවර්තනය කරන ලද Quick RNA මල පස ක්ෂුද්‍ර ජීවී කට්ටලය භාවිතා කරමින් RNA නිස්සාරණය කරගෙන ගියෙමු.[18]අර්ධ පෙරහන රෝල් කරන ලදී, ඉහළ පැත්ත ඇතුළට මුහුණලා,කට්ටලය තුළ සපයා ඇති පබළු සමග, 5 ml පොලිප්රොපිලීන් නලයක් තුළ.ලයිසිස්බෆරයේ ආරම්භක මිලිලීටර් 1 සිට, අපට ද්‍රාවණයේ ul 400 ක් පමණ ලබා ගැනීමට හැකි විය, පසුව එය සම්මත ප්‍රොටෝකෝල මගින් නිර්වචනය කරන ලද පරිදි සකසන ලද අතර එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ul 15 ක අවසාන අගයක් ලැබේ.පසුව, SARS-CoV-2 පරීක්ෂණය සඳහා ul 5ක් භාවිතා කරන ලදී.නියැදියේ විශේෂිත මූලාරම්භය අනුව, qScript XLT 1-පියවර RT-qPCR ToughMix භාවිතා කරන ලදී.[19]වර්ධක පද්ධති WHO වෙබ් අඩවියේ [20] ප්‍රකාශයට පත් කරන ලද Corman et al විසින් සකස් කරන ලද ප්‍රොටෝකෝලයේ ඒවා විය.
මෙම පරීක්ෂණය පැහැදිලිවම ඉලක්ක කර තිබුණේ අංශු ද්‍රව්‍ය මත SARS-CoV-2 RNA පවතින බව තහවුරු කිරීම හෝ බැහැර කිරීමය.පළමු විශ්ලේෂණය "E ජානය" අණුක සලකුණක් ලෙස භාවිතා කළ අතර, අපට අපේක්ෂා කළ හැකි පරිදි, Ct චක්‍ර 36-38 අතර වුවද පෙරහන් 16 න් 15 ක්ම ආකර්ෂණීය ධනාත්මක ප්‍රතිඵලයක් ලබා දුන්නේය.
ඉන් පසුව, අපි "RtDR ජානය" අණුක සලකුණු කාරකයක් ලෙස භාවිතා කරමින් ධනාත්මක පෙරහන් 6ක් (දැනටමත් "E ජානය" වෙත ධනාත්මක) විශ්ලේෂණය නැවත සිදු කර ඇත - එය SARS-CoV-2 සඳහා ඉතා විශේෂිත වූ - සැලකිය යුතු ප්‍රතිඵල 5ක් කරා ළඟා වේ. ධනාත්මක බව;ව්යාජ ධනාත්මක බව බැහැර කිරීම සඳහා පාලන පරීක්ෂණ ද සාර්ථකව සිදු කරන ලදී (රූපය 1).
පවතින හිඟ නියැදි ද්‍රව්‍ය අවසන් වීම වළක්වා ගැනීම සඳහා, ඉතිරි නිස්සාරණය කරන ලද RNA ප්‍රාදේශීය විශ්ව විද්‍යාල රෝහලට (SARS-CoV-2 රෝග විනිශ්චය පරීක්ෂණ සඳහා ඉතාලි රජය විසින් අවසර ලබා දී ඇති සායනික මධ්‍යස්ථානයක්) වෙත ලබා දෙන ලදී. සමාන්තර අන්ධ පරීක්ෂණය.මෙම දෙවන සායනික රසායනාගාරය E, N සහ RdRP ජාන සඳහා RNA නිස්සාරණ 34ක් පරීක්‍ෂා කරන ලද අතර, අවම වශයෙන් මාර්කර් ජාන තුනෙන් එකක් සඳහා ධනාත්මක ප්‍රතිඵල 7ක් වාර්තා කළ අතර, එම සලකුණු තුන සඳහාම ධනාත්මක බව වෙන වෙනම තහවුරු කර ඇත (රූපය 2).නියැදියේ ස්වභාවය නිසා සහ නියැදීම සිදු කර ඇත්තේ සායනික රෝග විනිශ්චය අරමුණු සඳහා නොව පාරිසරික දූෂණ පරීක්ෂණ සඳහා බව සැලකිල්ලට ගනිමින් (අණුක ජාන විශ්ලේෂණයට භාජනය වීමට පෙර අවම වශයෙන් සති හතරක්වත් පෙරහන් ගබඩා කර ඇති බව සැලකිල්ලට ගනිමින්.ඉතාලි වසා දැමීමේ ප්‍රතිඵලයක් ලෙස), ෆිල්ටර 8ක ඉතා නිශ්චිත “RtDR ජානය” හඳුනා ගැනීමෙන් SARS-CoV-2 වෛරස් RNA පවතින බව සාධාරණ ලෙස ඔප්පු කර ඇති බව අපට තහවුරු කළ හැක.කෙසේ වෙතත්, පෙරහන් වලින් අමතර ද්‍රව්‍ය නොමැතිකම නිසා, අණුක සලකුණු 3ටම එකවර ධනාත්මක බව පෙන්වීමට ප්‍රමාණවත් පරීක්ෂණ සංඛ්‍යාවක් නැවත කිරීමට අපට නොහැකි විය.
SARS-CoV-2 RNA එළිමහන් අංශු ද්‍රව්‍ය මත පැවතිය හැකි බවට වන පළමු මූලික සාක්ෂිය මෙය වන අතර, එමඟින් වායුගෝලීය ස්ථායීතාවය සහ PM සාන්ද්‍රණය ඉහළ මට්ටමක පවතින විට, SARS-CoV-2 එළිමහන් PM සමඟ පොකුරු නිර්මාණය කළ හැකි බව යෝජනා කරයි. ඔවුන්ගේ විසරණ සංගුණකය අඩු කිරීම - වායුගෝලයේ වෛරසයේ පැවැත්ම වැඩි දියුණු කිරීම.මෙම මූලික පිළිබඳ වැඩිදුර තහවුරු කිරීම්සාක්ෂි සිදුවෙමින් පවතින අතර, SARS-CoV-2 හි ජීව ශක්තිය මෙන්ම අංශු ද්‍රව්‍ය මත අවශෝෂණය කරන විට එහි වයිරසය පිළිබඳ තත්‍ය කාලීන තක්සේරුව ඇතුළත් විය යුතුය.වර්තමානයේදී, PM මත වෛරසය පැවතීම සහ COVID-19 පුපුරා යාමේ ප්‍රගතිය අතර සහසම්බන්ධය සම්බන්ධයෙන් කිසිදු උපකල්පනයක් කළ නොහැක.විශේෂයෙන් ආමන්ත්‍රණය කළ යුතු අනෙකුත් ගැටළු වන්නේ අවසානයේ PM හි සාමාන්‍ය සාන්ද්‍රණයයිබෝවන රෝගයේ විභව “වර්ධන බලපෑම” සඳහා අවශ්‍ය වේ (PM වයිරස් බිංදු න්‍යෂ්ටි සඳහා “වාහකයක්” ලෙස ක්‍රියා කළ හැකි බව තහවුරු වුවහොත්), හෝ PM හි පහළ සීමාවන්හිදී අවම මාත්‍රාවක් නිරාවරණය වීමෙන් ප්‍රතිශක්තිකරණයේ න්‍යායාත්මක හැකියාව පවා .

Fig.1 E (A) සහ RdRP ජානවල වර්ධක වක්‍ර (B): හරිත රේඛා පරීක්ෂා කරන ලද පෙරහන් නියෝජනය කරයි;හරස් රේඛායොමු පෙරහන් නිස්සාරණය නියෝජනය කරයි;රතු රේඛා ධනාත්මක සාම්පලවල විස්තාරණය නියෝජනය කරයි.
Fig.1

Fig.2.සියලුම 34 PM10 නියැදිය සඳහා ලබාගත් E, N සහ RdRP ජාන සඳහා ධනාත්මක ප්‍රතිඵල (X සමඟ ලකුණු කර ඇත)දෙවන සමාන්තර විශ්ලේෂණ වලදී පරීක්ෂා කරන ලද පෙරහන්.
Fig.2Leonardo Setti1, Fabrizio Passarini2, Gianluigi De Gennaro3, Pierluigi Barbieri4, Maria Grazia Perrone5, Massimo Borelli6, Jolanda Palmisani3, Alessia Di Gilio3, Valentina Torboli6, Alberto Pallavicini6, Alberto Pallavicini6, Miurscellio8, Pi7izellisio,
1. දෙපාර්තමේන්තුව කාර්මික රසායන විද්‍යාව, බොලොග්නා විශ්වවිද්‍යාලය, Viale del Risorgimento – 4, I-40136, Bologna, ඉතාලිය
e-mail: leonardo.setti@unibo.it
2. කාර්මික පර්යේෂණ සඳහා අන්තර් දෙපාර්තමේන්තු මධ්යස්ථානය "පුනර්ජනනීය මූලාශ්ර, පරිසරය, නිල් වර්ධනය, බලශක්තිය",
University of Bologna, Rimini, Italy e-mail: fabrizio.passarini@unibo.it
3. ජීව විද්‍යා දෙපාර්තමේන්තුව, ඉතාලියේ බාරි හි "ඇල්ඩෝ මොරෝ" විශ්ව විද්‍යාලය
e-mail: gianluigi.degennaro@uniba.it; alessia.digilio@uniba.it; jolanda.palmisani@uniba.it
4. රසායන හා ඖෂධ විද්‍යා දෙපාර්තමේන්තුව, ට්‍රයිස්ටේ විශ්වවිද්‍යාලය, ට්‍රයිස්ටේ, ඉතාලිය
e-mail: barbierp@units.it
5. පාරිසරික පර්යේෂණ අංශය, TCR TECORA, මිලාන්, ඉතාලිය
e-mail: mariagrazia.perrone@tcrtecora.com
6. ජීවිත විද්‍යා දෙපාර්තමේන්තුව - ට්‍රයිස්ටේ විශ්ව විද්‍යාලය, ට්‍රයිස්ටේ, ඉතාලිය
e-mail: borelli@units.it; torboli@units.it; pallavic@units.it
7. රසායනාගාර වෛද්‍ය අංශය, විශ්ව විද්‍යාල රෝහල Giuliano Isontina (ASU GI), Trieste, ඉතාලිය
email: maurizio.ruscio@asugi.sanita.fvg.it
8. පාරිසරික වෛද්‍ය විද්‍යාව පිළිබඳ ඉතාලි සංගමය (SIMA), මිලාන්, ඉතාලිය
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
9. පාරිසරික විද්‍යා දෙපාර්තමේන්තුව සහ Poicy, මිලාන් විශ්ව විද්‍යාලය, මිලාන්, ඉතාලිය
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
අනුරූප කර්තෘ:
ලියනාඩෝ සෙට්ටි, Department of Industrial Chemistry, University of Bologna Viale del Risorgimento 4, 40136, Bologna, Italy; e-mail: leonardo.setti@unibo.it

යොමු කිරීම්
1. ලෝක සෞඛ්‍ය සංවිධානය, COVID-19 ඇති කරන වෛරස් සම්ප්‍රේෂණය කිරීමේ ක්‍රම: IPC පූර්වාරක්ෂාව නිර්දේශ සඳහා ඇඟවුම්, විද්‍යාත්මක කෙටියෙන්;ලබා ගත හැක්කේ: https://www.who.int/newsroom/commentaries/detail/modes-of-transmission-of-virus-causing-covid-19-implications-for-ipcprecaution-recommendations (29 මාර්තු 2020)
2. ඉතාලි සෞඛ්‍ය අමාත්‍යාංශය, ඉතාලියේ දෛනික පුවත් Covid-19 පැතිරීම, http://www.salute.gov.it/imgs/C_17_notizie_4451_0_file.pdf වෙතින් ලබා ගත හැකිය
3. EEA, යුරෝපීය පරිසර නියෝජිතායතනය, යුරෝපයේ වායු තත්ත්ව 2019 වාර්තාව;අංක 10/2019;යුරෝපීය පරිසර නියෝජිතායතනය: කෝපන්හේගන්, ඩෙන්මාර්කය, availbale: https://www.eea.europa.eu/publications/airquality-in-europe-2019
4. Xiao Wu, Rachel C. Nethery, M. Benjamin Sabath, Danielle Braun, Francesca Dominici, එක්සත් ජනපදයේ වායු දූෂණයට සහ COVID-19 මරණවලට නිරාවරණය වීම, මෙතැනින් ලබා ගත හැකිය: https://projects.iq.harvard.edu/ ගොනු/covid-pm/files/pm_and_covid_mortality.pdf
5. ඉතාලි පාරිසරික වෛද්‍ය සංගමය (SIMA), ස්ථාන කඩදාසි අංශු ද්‍රව්‍ය සහ COVID-19,
ලබා ගත හැක්කේ: http://www.simaonlus.it/wpsima/wp-content/uploads/2020/03/COVID_19_positionpaper_ENG.pdf
6. Setti L., Passarini F., De Gennaro G., Barbieri P., Perrone MG, Piazzalunga A., Borelli M., Palmisani J., Di Gilio A, Piscitelli P, Miani A., පිළිගත හැකි භූමිකාවක් තිබේද? උතුරු ඉතාලියේ COVID-19 ව්‍යාප්ත වීමේ අංශු මාත්‍ර සඳහා?, BMJ වේගවත් ප්‍රතිචාර, 2020 අප්‍රේල් 8, මෙතැනින් ලබා ගත හැකිය: https://www.bmj.com/content/368/bmj.m1103/rapid-responses
7. Sedlmaier, N., Hoppenheidt, K., Krist, H., Lehmann, S., Lang, H., Buttner, M. කුරුළු ඉන්ෆ්ලුවෙන්සා වෛරසය (AIV) දූෂිත මළ සියුම් අංශු (PM2.5): ජාන සහ ආසාදන හඳුනා ගැනීම සහ ප්රතිශක්තිකරණය ගණනය කිරීම.පශු වෛද්ය ක්ෂුද්ර ජීව විද්යාව.139, 156-164 (2009)
8. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. ගුවන් සම්ප්‍රේෂණය 2015 අධික ව්යාධිජනක කුරුළු ඉන්ෆ්ලුවෙන්සා පැතිරීම සඳහා භූමිකාවක් ඉටු කර ඇත. එක්සත් ජනපදය.Sci Rep. 9, 11755. https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
9. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. බටහිර චීනයේ සරම්ප සිදුවීම් මත දූවිලි සිදුවීම්වල බලපෑම පිළිබඳ තක්සේරුව.වායුගෝලීය පරිසරය.157, 1-9 (2017)
10. Sorensen, JH, Mackay, DKJ, Jensen, C. Ø., Donaldson, AI පාද සහ මුඛ රෝග වෛරසය Epidemiol වායුගෝලීය ව්‍යාප්තිය පුරෝකථනය කිරීම සඳහා ඒකාබද්ධ ආකෘතියකි.ආසාදනය., 124, 577-590 (2000)
11. Glostera, J., Alexandersen, S. නව දිශාවන්: පාද සහ මුඛ රෝග වෛරස් වායුගෝලීය පරිසරය, 38 (3), 503-505 (2004)
12. Reche, I., D'Orta, G., Mladenov, N., Winget, DM, Suttle, CA වායුගෝලීය මායිම් ස්ථරයට ඉහලින් වෛරස් හා බැක්ටීරියා තැන්පත් වීමේ අනුපාත.ISME සඟරාව.12, 1154-1162 (2018)
13. Qin, N., Liang, P., Wu, C., Wang, G., Xu, Q., Xiong, X., Wang, T., Zolfo, M., Segata, N., Qin, H ., නයිට්, ආර්., ගිල්බට්, ජේඒ, ෂු, ටීඑෆ් මෙගාසිටි එකක අංශු ද්‍රව්‍ය හා සම්බන්ධ ක්ෂුද්‍ර ජීවී කල්පවත්නා සමීක්ෂණය.ජාන ජීව විද්යාව.21, 55 (2020)
14. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. ගුවන් සම්ප්‍රේෂණය තිබිය හැක
එක්සත් ජනපදයේ 2015 අධික ව්යාධිජනක කුරුළු ඉන්ෆ්ලුවෙන්සා පැතිරීම සඳහා භූමිකාවක් ඉටු කළේය.විද්‍යා
නි. 9, 11755. https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
15. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. බටහිර චීනයේ සරම්ප සිදුවීම් මත දූවිලි සිදුවීම්වල බලපෑම පිළිබඳ තක්සේරුව.වායුගෝලීය පරිසරය.157, 1-9 (2017)
16. Jiang, W., Laing, P., Wang, B., Fang, J., Lang, J., Tian, ​​G., Jiang, J., Zhu, TF ප්‍රශස්ත DNA නිස්සාරණය සහ වාතයේ ඇති ක්ෂුද්‍රජීවී ප්‍රජාවන්ගේ metagenomic අනුපිළිවෙල .නැට්.ප්රොටොක්.10, 768-779 (2015)
17. Pan, M., Lednicky, JA, Wu, C.-Y., එකතු කිරීම, අංශු ප්රමාණය සහ වාතයේ වෛරස් හඳුනා ගැනීම.ව්‍යවහාරික ක්ෂුද්‍ර ජීව විද්‍යාව පිළිබඳ සඟරාව, 127, 1596-1611 (2019)
18. Zymoresearch Ldt, නිෂ්පාදන විස්තරය, ලබා ගත හැක්කේ: https://www.zymoresearch.com/products/quick-rnafecal-soil-microbe microprep-kit
19. Quantabio Ltd, නිෂ්පාදනයේ විස්තරය, ලබා ගත හැක්කේ: https://www.quantabio.com/qscript-xlt-1-steprt-qpcr-toughmix
20. Corman, VM, Landt, O., Kaiser, M., Molenkamp, ​​R., Meijer, A., Chu, DK, & Multers, DG (2020).
තත්‍ය කාලීන RT-PCR මගින් 2019 නව කොරෝනා වයිරස් (2019-nCoV) හඳුනා ගැනීම.Eurosurveillance, 25(3), ලබා ගත හැක්කේ:.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6988269/

මුල්: https://doi.org/10.1101/2020.04.15.20065995


පසු කාලය: අප්රේල්-18-2020