SARS-Cov-2 RNA په شمالي ایټالیا کې د برګامو د ذراتو په اړه وموندل شو: لومړی لومړني شواهد

شدید تنفسي سنډروم چې د COVID-19 ناروغۍ په نوم پیژندل کیږي - د SARS-CoV-2 ویروس له امله پیژندل شوی - د تنفسي څاڅکو او نږدې تماسونو له لارې خپریږي.[1]د CoVID-19 بوج په لومبارډي او پو ویلی (شمالي ایټالیا) کې خورا شدید و ، [2] یوه سیمه چې د ذرو لوړ غلظت لخوا مشخص شوی ، کوم چې دمخه پیژندل شوي چې د انسان روغتیا باندې منفي اغیزې رامینځته کوي.[3]د اپریل په 12 نیټه د ایټالیا لپاره موجود سیمه ایز ارقام ښیې چې اوس مهال شاوخوا 30٪ مثبت خلک لاهم په لومبارډي کې ژوند کوي (شاوخوا 40٪ که چیرې د ناروغۍ له پیل راهیسې تایید شوي عمومي قضیې په پام کې ونیول شي) ، ورپسې ایمیلیا رومګنا (13.5٪) پیډمونټ (10.5٪)، او وینټو (10٪).[2]د پو ویلی دا څلور سیمې په ایټالیا کې د ثبت شویو ټولو مړینو 80٪ او د جدي پاملرنې واحدونو داخلو 65٪ جوړوي.[2]

یوه څیړنه چې د هارورډ د عامې روغتیا ښوونځي لخوا ترسره شوې داسې ښکاري چې په متحده ایالاتو کې د COVID-19 له امله د PM غلظت او د مړینې کچه کې د زیاتوالي ترمینځ اړیکه تاییدوي[4] په تیرو مخابراتو کې ، موږ د SARS-CoV-2 احتمال فرض کړی و. ویروس د انفیکشن د خپریدو په جریان کې په ذراتو (PM) کې شتون لري، [5,6] په دوامداره توګه د شواهدو سره
د نورو ویروسونو لپاره شتون لري [7-15] په هرصورت، د هوا له لارې د PM پورې تړلي مایکروبیوم مسله، په ځانګړې توګه په ښاري چاپیریال کې، په لویه کچه تر تحقیق لاندې پاتې ده، [16] او - په اوس وخت کې - هیڅوک لا تر اوسه په ځانګړې توګه تجربه شوي مطالعات ندي ترسره کړي. په PM کې د SARS-CoV-2 شتون تایید یا لرې کولو کې.
دلته، موږ د تحلیلونو لومړنۍ پایلې وړاندې کوو چې موږ د برګامو ولایت له صنعتي سایټ څخه د بیروني/هوایی PM10 نمونو 34 PM10 نمونې ترسره کړې چې د دوه مختلف هوا نمونو سره د 3 اونیو په دوامداره موده کې راټول شوي، د فبروري له 21 څخه تر مارچ پورې. دیارلسمه.
د Pan et al لخوا تشریح شوي میتودولوژي تعقیب کړئ.په 2019 کې (د راټولولو، ذرې اندازه کولو او د هوا څخه د ویروسونو کشف کولو لپاره)، [17] د PM نمونې د کوارټز فایبر فلټرونو کې د ټیټ حجم ګرویمیټریک هوا نمونې (38.3 لیټر / دقیقې لپاره د 23 ساعتونو لپاره) په کارولو سره راټول شوي، د حوالې میتود EN12341 سره مطابقت لري :2014 د PM10 څارنې لپاره.ذرات د 99.9% عادي سره په فلټرونو کې ځړول شويد ایروسول ساتل، په سمه توګه ذخیره شوي او د ټریسټ پوهنتون د تطبیق شوي او پرتله کولو جینومیک لابراتوار ته سپارل شوي.د نمونې "چاپیریال" ماهیت ته په پام سره، په احتمالي توګه د DNA پولیمیریز مخنیوی کونکو څخه بډایه، موږ د RNA استخراج ته د چټک RNA فیکل سوائل مایکروب کټ په کارولو سره پرمخ یوو چې د فلټرونو ډول سره تطبیق شوي.[18]نیمه فلټر رول شوی و، د پورتنۍ اړخ سره مخامخ دی،په 5 ملی لیتر پولی پروپیلین ټیوب کې، د مچیو سره یوځای په کټ کې چمتو شوي.د لیسز بفر له لومړني 1 ملی لیتر څخه، موږ وکولی شو شاوخوا 400 ul محلول ترلاسه کړو، کوم چې بیا د معیاري پروتوکولونو لخوا تعریف شوي پروسس شوی و، په پایله کې د 15 ul وروستی روښانه کول.وروسته، 5 ul د SARS-CoV-2 ازموینې لپاره کارول شوي.د نمونې ځانګړي اصل ته په پام سره، د qScript XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix کارول شوی و.[19]د امپلیفیکیشن سیسټمونه هغه پروتوکول وو چې د کورمان ایټ ال لخوا رامینځته شوي ، د WHO په ویب پا onه کې خپاره شوي [20].
ازموینه په ښکاره ډول د SARS-CoV-2 RNA شتون تایید یا لرې کولو په برخه کې د ذراتو په اړه و.په لومړي تحلیل کې "E جین" د مالیکولر مارکر په توګه وکارول شو او د 16 فلټرونو څخه 15 کې یې اغیزمنه مثبته پایله تولید کړه حتی که موږ تمه کولی شو، Ct د 36-38 دورې ترمنځ و.
له هغې وروسته، موږ د "RtDR جین" د مالیکول مارکر په توګه په کارولو سره د 6 مثبت فلټرونو (مخکې له مخکې "E جین" ته مثبت) تحلیل تکرار کړ - کوم چې د SARS-CoV-2 لپاره خورا مشخص دی - د 5 پام وړ پایلو ته رسي. مثبتیت؛د غلط مثبتیت لرې کولو لپاره د کنټرول ازموینې هم په بریالیتوب سره ترسره شوې (1 شکل).
د موجودو نمونو اخیستلو موادو له کمښت څخه د مخنیوي لپاره، پاتې استخراج شوي RNAs د محلي پوهنتون روغتون (یو له کلینیکي مرکزونو څخه دی چې د SARS-CoV-2 تشخیصي ازموینو لپاره د ایټالیا حکومت لخوا اختیار شوی) ته وسپارل شو. موازي ړوند ازموینه.دې دوهم کلینیکي لابراتوار د E, N او RdRP جینونو لپاره 34 RNA استخراجونه ازمویل، لږترلږه د دریو مارکر جینونو څخه د یوې لپاره د 7 مثبت پایلو راپور ورکوي، د ټولو دریو مارکرانو لپاره مثبتیت په جلا توګه تایید شوی (انځور 2).د نمونې د نوعیت له امله، او په پام کې نیولو سره چې نمونه اخیستل د کلینیکي تشخیصي موخو لپاره ندي ترسره شوي مګر د چاپیریال ککړتیا ازموینې لپاره (دا هم په پام کې نیولو سره چې فلټرونه د مالیکولر جنیټیک تحلیلونو څخه لږ تر لږه د څلورو اونیو لپاره ساتل شوي وو، لکه څنګه چېد ایټالیا د بندیدو پایله) ، موږ کولی شو تصدیق وکړو چې په 8 فلټرونو کې د خورا ځانګړي "RtDR جین" موندلو سره د SARS-CoV-2 ویروس RNA شتون په معقول ډول ښودل شوی.په هرصورت، د فلټرونو څخه د اضافي موادو نشتوالي له امله، موږ نشو کولی په کافي اندازه ازموینې تکرار کړو ترڅو په ورته وخت کې د ټولو 3 مالیکولر مارکرونو لپاره مثبتیت وښیو.
دا لومړنی لومړني شواهد دي چې د SARS-CoV-2 RNA کیدای شي په بیروني ذراتو کې شتون ولري، په دې توګه وړاندیز کوي چې د اتموسفیر ثبات او د PM لوړ غلظت په شرایطو کې، SARS-CoV-2 کولی شي د بهرنی PM سره کلسترونه رامینځته کړي او - د دوی د خپریدو کثافاتو کمول - په اتموسفیر کې د ویروس دوام ته وده ورکوي.د دې ابتدايي نور تاییدشواهد روان دي، او باید د SARS-CoV-2 د ژوندانه په اړه د ریښتیني وخت ارزونه او همدارنګه د هغې ویرلیت شامل وي کله چې په ذراتو کې جذب شي.په اوس وخت کې، په PM کې د ویروس شتون او د COVID-19 ناروغۍ پرمختګ تر منځ د اړیکو په اړه هیڅ انګیرنه نشي کیدی.نورې مسلې چې په ځانګړې توګه په ګوته کیږي د PM اوسط غلظت ديد ساري ناروغۍ د احتمالي "بوسټ اغیز" لپاره اړین دي (په هغه صورت کې چې دا تایید شي چې PM ممکن د ویروس څاڅکي نیوکلی لپاره د "کیریر" په توګه عمل وکړي) یا حتی د معافیت تیوریکي امکان د PM په ټیټ حد کې د لږترلږه دوز څرګندیدو په پایله کې. .

انځور 1 د E (A) او RdRP جینونو (B) پراخولو منحني: شنه کرښې د ازمول شوي فلټرونو استازیتوب کوي؛کراس کرښېد حوالې فلټر استخراج استازیتوب کوي؛سره کرښې د مثبتو نمونو پراخوالی څرګندوي.
انځور.1

انځور.2.د ټولو 34 PM10 نمونو لپاره ترلاسه شوي د E، N او RdRP جینونو لپاره مثبت پایلې (د X سره نښه شوي)فلټرونه په دوهم موازي تحلیلونو کې ازمول شوي.
انځور.2Leonardo Setti1, Fabrizio Passarini2, Gianluigi De Gennaro3, Pierluigi Barbieri4, Maria Grazia Perrone5, Massimo Borelli6, Jolanda Palmisani3, Alessia Di Gilio3, Valentina Torboli6, Alberto Pallavicini6, Maurizio Pricocit, Micoellis, AN88
1. د صنعتی کیمیا څانګه، د بولونا پوهنتون، Viale del Risorgimento – 4، I-40136، بولونا، ایټالیا
e-mail: leonardo.setti@unibo.it
2. د صنعتي څیړنو لپاره د بین المللي څانګې مرکز "د تجدید وړ سرچینې، چاپیریال، نیلي وده، انرژي"،
University of Bologna, Rimini, Italy e-mail: fabrizio.passarini@unibo.it
3. د بیولوژي څانګه، د باری، باری، ایټالیا پوهنتون "الدو مورو"
e-mail: gianluigi.degennaro@uniba.it; alessia.digilio@uniba.it; jolanda.palmisani@uniba.it
4. د کیمیاوي او درمل جوړولو علومو څانګه، د ټریسټ پوهنتون، ټریسټ، ایټالیا
e-mail: barbierp@units.it
5. د چاپیریال څیړنې څانګه، TCR TECORA، میلان، ایټالیا
e-mail: mariagrazia.perrone@tcrtecora.com
6. د ژوند علومو څانګه – د تریستی پوهنتون، تریستی، ایټالیا
e-mail: borelli@units.it; torboli@units.it; pallavic@units.it
7. د لابراتوار طب څانګه، د پوهنتون روغتون Giuliano Isontina (ASU GI)، Trieste، ایټالیا
email: maurizio.ruscio@asugi.sanita.fvg.it
8. د چاپیریال درملو ایټالیا ټولنه (سیما)، میلان، ایټالیا
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
9. د چاپیریال ساینس او ​​​​پایسي څانګه، د میلان پوهنتون، میلان، ایټالیا
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
اړوند لیکوال:
لیونارډو سیټي، Department of Industrial Chemistry, University of Bologna Viale del Risorgimento 4, 40136, Bologna, Italy; e-mail: leonardo.setti@unibo.it

حوالې
1. د روغتیا نړیوال سازمان، د ویروس د لیږد طریقې چې د COVID-19 لامل کیږي: د آی.پی.سی د احتیاطي سپارښتنو اغیزې، ساینسي لنډیز؛دلته شتون لري: https://www.who.int/newsroom/commentaries/detail/modes-of-transmission-of-virus-causing-covid-19-implications-for-ipcprecaution-recommendations (29 مارچ 2020)
2. د ایټالیا د روغتیا وزارت، په ایټالیا کې د کوویډ - 19 ناروغۍ ورځنۍ خبرتیا، په http://www.salute.gov.it/imgs/C_17_notizie_4451_0_file.pdf کې شتون لري
3. EEA، د اروپا د چاپیریال اداره، په اروپا کې د هوا کیفیت 2019 راپور؛شمیره 10/2019;د اروپا د چاپیریال اداره: کوپنهاګن، ډنمارک، دلته شتون لري: https://www.eea.europa.eu/publications/airquality-in-europe-2019
4. Xiao Wu، Rachel C. Nethery، M. Benjamin Sabath، Danielle Braun، Francesca Dominici، په متحده ایالاتو کې د هوا ککړتیا او د COVID-19 مړینې سره مخ کیدل، دلته شتون لري: https://projects.iq.harvard.edu/ فایلونه/covid-pm/files/pm_and_covid_mortality.pdf
5. د چاپیریال د درملو ایټالیا ټولنه (سیما)، د موقعیت کاغذ ذرات او COVID-19،
دلته شتون لري: http://www.simaonlus.it/wpsima/wp-content/uploads/2020/03/COVID_19_positionpaper_ENG.pdf
6. Setti L.، Passarini F.، De Gennaro G.، Barbieri P.، Perrone MG، Piazzalunga A.، Borelli M.، Palmisani J.، Di Gilio A، Piscitelli P، Miani A.، ایا د پام وړ رول شتون لري؟ په شمالي ایټالیا کې د COVID-19 په خپریدو کې د ذراتو مسلو لپاره؟، BMJ چټک غبرګونونه، د اپریل په 8 مه 2020، په دې ځای کې شتون لري: https://www.bmj.com/content/368/bmj.m1103/rapid-responses
7. Sedlmaier, N., Hoppenheidt, K., Krist, H., Lehmann, S., Lang, H., Buttner, M. د حیوان انفلونزا ویروس (AIV) د ککړ شوي فیکل نفیس ذرات (PM2.5) تولید: جینوم او د انفیکشن کشف او د معافیت محاسبه.وترنری مایکروبیولوژی.139، 156-164 (2009)
8. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. هوایی لیږد ممکن په 2015 کې د مرغانو د مرغانو انفلونزا په خپریدو کې رول لوبولی وي. متحده ایالات.د ساینس ریپټمبر 9، 11755. https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
9. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. په لویدیځ چین کې د شری په پیښو باندې د دوړو پیښو د اغیزو ارزونه.اتموسفیر چاپیریال.157، 1-9 (2017)
10. Sorensen, JH, Mackay, DKJ, Jensen, C. Ø., Donaldson, AI یو مدغم ماډل چې د پښو او خولې ناروغۍ ویروس ایپیډیمیول د اتموسفیر خپریدو وړاندوینه کوي.انفیکشن.، 124، 577-590 (2000)
11. Glostera, J., Alexandersen, S. نوي لارښوونې: د پښو او خولې ناروغۍ د هوا له لارې لیږدونې ویروس اتموسفیر چاپیریال، 38 (3)، 503-505 (2004)
12. Reche, I., D'Orta, G., Mladenov, N., Winget, DM, Suttle, CA د وایروسونو او باکتریا د ذخیرې کچه د اتموسفیر له حد څخه پورته.د ISME ژورنال.12, 1154-1162 (2018)
13. Qin, N., Liang, P., Wu, C., Wang, G., Xu, Q., Xiong, X., Wang, T., Zolfo, M., Segata, N., Qin, H. .، نایټ، آر.، ګیلبرټ، JA، Zhu، TF د مایکروبیوم اوږدمهاله سروې چې په یوه لوی ښار کې د ذراتو موادو سره تړاو لري.جینوم بیولوژي۲۱، ۵۵ (۲۰۲۰)
14. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. هوایی لیږد ممکن شتون ولري.
په متحده ایالاتو کې د 2015 د خورا رنځجنیک مرغانو انفلونزا خپریدو کې رول لوبولی.ساینس
بیا 9، 11755. https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
15. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. په لویدیځ چین کې د شری په پیښو باندې د دوړو پیښو د اغیزو ارزونه.اتموسفیر چاپیریال.157، 1-9 (2017)
16. جیانګ، وی، لاینګ، پی، وانګ، بی، فانګ، جې، لینګ، جې، تیان، جی، جیانګ، ژ، ژو، TF د DNA استخراج او د هوایی مایکروبیل ټولنو میټاجینومیک ترتیب کول .نیټ.پروتوک10، 768-779 (2015)
17. Pan, M., Lednicky, JA, Wu, C.-Y.، راټولول، د ذراتو اندازه کول او د هوا له لارې د ویروسونو کشف کول.د اپلایډ مایکروبیولوژي ژورنال، 127، 1596-1611 (2019)
18. Zymoresearch Ldt، د محصول توضیحات، دلته شتون لري: https://www.zymoresearch.com/products/quick-rnafecal-soil-microbe microprep-kit
19. Quantabio Ltd، د محصول تشریح، دلته شتون لري: https://www.quantabio.com/qscript-xlt-1-steprt-qpcr-toughmix
20. Corman, VM, Landt, O., Kaiser, M., Molenkamp, ​​R., Meijer, A., Chu, DK, & Mulders, DG (2020).
د ریښتیني وخت RT-PCR لخوا د 2019 ناول کورونویرس (2019-nCoV) کشف.یورو سرویلانس، 25(3)، دلته شتون لري: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6988269/

اصلي: https://doi.org/10.1101/2020.04.15.20065995


د پوسټ وخت: اپریل 18-2020