উত্তর ইতালির বারগামোর পার্টিকুলেট ম্যাটারে SARS-Cov-2 RNA পাওয়া গেছে: প্রথম প্রাথমিক প্রমাণ

গুরুতর তীব্র শ্বাসযন্ত্রের সিন্ড্রোম যা COVID-19 রোগ নামে পরিচিত - SARS-CoV-2 ভাইরাসের কারণে - শ্বাসযন্ত্রের ফোঁটা এবং ঘনিষ্ঠ যোগাযোগের মাধ্যমে ছড়িয়ে পড়ার জন্য স্বীকৃত।লোমবার্ডি এবং পো ভ্যালিতে (উত্তর ইতালি) COVID-19-এর বোঝা অত্যন্ত গুরুতর ছিল,[2] এমন একটি এলাকা যেখানে কণা পদার্থের উচ্চ ঘনত্ব দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছে, যা ইতিমধ্যেই মানব স্বাস্থ্যের উপর নেতিবাচক প্রভাব সৃষ্টি করতে পরিচিত।12ই এপ্রিল তারিখে ইতালির জন্য উপলব্ধ আঞ্চলিক পরিসংখ্যানগুলি দেখায় যে বর্তমানে প্রায় 30% ইতিবাচক লোক এখনও লোমবার্ডিতে বাস করে (প্রায় 40% যদি মহামারীর শুরু থেকে নিশ্চিত হওয়া সামগ্রিক ক্ষেত্রে বিবেচনা করা হয়), এরপরে এমিলিয়া রোমাগনা (13.5%) , পাইডমন্ট (10.5%), এবং ভেনেটো (10%)।পো উপত্যকার এই চারটি অঞ্চল ইতালিতে রেকর্ডকৃত মোট মৃত্যুর 80% এবং ইনটেনসিভ কেয়ার ইউনিটে ভর্তির 65% জন্য দায়ী।

হার্ভার্ড স্কুল অফ পাবলিক হেলথ দ্বারা পরিচালিত একটি গবেষণা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে COVID-19-এর কারণে প্রধানমন্ত্রীর ঘনত্ব এবং মৃত্যুর হার বৃদ্ধির মধ্যে একটি সম্পর্ক নিশ্চিত করে বলে মনে হচ্ছে ভাইরাস সংক্রমণ ছড়ানোর সময় পার্টিকুলেট ম্যাটারে (PM) উপস্থিত থাকতে পারে, [5,6] ধারাবাহিকভাবে ইতিমধ্যে প্রমাণ সহ
অন্যান্য ভাইরাসের জন্য উপলব্ধ। PM-তে SARS-CoV-2-এর উপস্থিতি নিশ্চিত বা বাদ দেওয়ার সময়।
এখানে, আমরা বার্গামো প্রদেশের একটি শিল্প সাইট থেকে বহিরঙ্গন/বায়ুবাহী PM10-এর 34 PM10 নমুনাগুলিতে সম্পাদিত বিশ্লেষণগুলির প্রথম ফলাফল উপস্থাপন করি, যা 21শে ফেব্রুয়ারি থেকে মার্চ পর্যন্ত একটানা 3-সপ্তাহের সময়কালে দুটি ভিন্ন বায়ুর নমুনা দিয়ে সংগ্রহ করা হয়েছিল। 13 তম।
প্যান এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসরণ করে।2019 সালে (সংগ্রহ, কণার আকার এবং বায়ুবাহিত ভাইরাস সনাক্তকরণের জন্য),[17] রেফারেন্স পদ্ধতি EN12341 এর সাথে সঙ্গতিপূর্ণ একটি লোভলিউম গ্র্যাভিমেট্রিক এয়ার স্যাম্পলার (38.3 লি/মিনিট) ব্যবহার করে কোয়ার্টজ ফাইবার ফিল্টারে পিএম নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল :2014 PM10 পর্যবেক্ষণের জন্য।কণা পদার্থ 99.9% সাধারণের সাথে ফিল্টারগুলিতে আটকা পড়েছিলঅ্যারোসল ধারণ, সঠিকভাবে সংরক্ষিত এবং ট্রিয়েস্ট ইউনিভার্সিটির ফলিত এবং তুলনামূলক জিনোমিক্সের পরীক্ষাগারে সরবরাহ করা।নমুনার "পরিবেশগত" প্রকৃতির প্রেক্ষিতে, সম্ভবত ডিএনএ পলিমারেজের ইনহিবিটর সমৃদ্ধ, আমরা ফিল্টারগুলির প্রকারের সাথে অভিযোজিত কুইক আরএনএ ফিকাল সয়েল মাইক্রোব কিট ব্যবহার করে আরএনএ নিষ্কাশনের সাথে এগিয়ে যাই।অর্ধেক ফিল্টার ঘূর্ণিত ছিল, উপরের দিকটি ভিতরের দিকে মুখ করে,একটি 5 মিলি পলিপ্রোপিলিন টিউবে, কিটে দেওয়া পুঁতির সাথে।লাইসিসবাফারের প্রাথমিক 1 মিলি থেকে, আমরা প্রায় 400 ul সমাধান পেতে সক্ষম হয়েছিলাম, যা তারপরে স্ট্যান্ডার্ড প্রোটোকল দ্বারা সংজ্ঞায়িত হিসাবে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল, যার ফলে 15 ul এর চূড়ান্ত ইলুয়েট হয়েছিল।পরবর্তীকালে, SARS-CoV-2 পরীক্ষার জন্য 5 ul ব্যবহার করা হয়েছিল।নমুনার নির্দিষ্ট উত্স দেওয়া, qScript XLT 1-ধাপে RT-qPCR টাফমিক্স ব্যবহার করা হয়েছিল।[19]অ্যামপ্লিফিকেশন সিস্টেমগুলি ছিল কোরম্যান এট আল দ্বারা তৈরি প্রোটোকলের মধ্যে, যা WHO ওয়েবসাইটে প্রকাশিত হয়েছিল [20]।
পরীক্ষাটি স্পষ্টভাবে কণার উপর SARS-CoV-2 RNA এর উপস্থিতি নিশ্চিত করা বা বাদ দেওয়ার লক্ষ্যে ছিল।প্রথম বিশ্লেষণটি একটি আণবিক চিহ্নিতকারী হিসাবে "E জিন" ব্যবহার করেছে এবং 16টি ফিল্টারের মধ্যে 15টিতে একটি চিত্তাকর্ষক ইতিবাচক ফলাফল তৈরি করেছে, এমনকি যদি আমরা আশা করতে পারি, Ct 36-38 চক্রের মধ্যে ছিল।
এর পরে, আমরা 6টি ইতিবাচক ফিল্টারে বিশ্লেষণের প্রতিলিপি করেছি (ইতিমধ্যেই "ই জিনে" ইতিবাচক) একটি আণবিক চিহ্নিতকারী হিসাবে "RtDR জিন" ব্যবহার করে - যা SARS-CoV-2-এর জন্য অত্যন্ত নির্দিষ্ট - 5টি উল্লেখযোগ্য ফলাফলে পৌঁছেছে ইতিবাচকতা;মিথ্যা ইতিবাচকতা বাদ দেওয়ার জন্য নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষাগুলিও সফলভাবে সম্পাদিত হয়েছিল (চিত্র 1)।
উপলব্ধ নমুনার উপাদানের অভাব এড়াতে, অবশিষ্ট আহরিত আরএনএগুলি স্থানীয় বিশ্ববিদ্যালয় হাসপাতালে (সারস-কোভি-২ ডায়াগনস্টিক পরীক্ষার জন্য ইতালীয় সরকার কর্তৃক অনুমোদিত ক্লিনিকাল কেন্দ্রগুলির মধ্যে একটি) পৌঁছে দেওয়া হয়েছিল, যাতে একটি সেকেন্ড সম্পাদন করা যায়। সমান্তরাল অন্ধ পরীক্ষা।এই দ্বিতীয় ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিটি E, N এবং RdRP জিনের জন্য 34টি আরএনএ নিষ্কাশন পরীক্ষা করেছে, তিনটি চিহ্নিতকারী জিনের মধ্যে অন্তত একটির জন্য 7টি ইতিবাচক ফলাফল রিপোর্ট করেছে, তিনটি চিহ্নিতকারীর জন্য পৃথকভাবে ইতিবাচকতা নিশ্চিত করা হয়েছে (চিত্র 2)।নমুনার প্রকৃতির কারণে, এবং বিবেচনা করে যে নমুনাটি ক্লিনিকাল ডায়গনিস্টিক উদ্দেশ্যে নয় বরং পরিবেশ দূষণ পরীক্ষার জন্য করা হয়েছে (এটাও বিবেচনায় নেওয়া হয়েছে যে আণবিক জেনেটিক বিশ্লেষণের আগে ফিল্টারগুলি কমপক্ষে চার সপ্তাহ ধরে সংরক্ষণ করা হয়েছিল, যেমনইতালীয় শাটডাউনের পরিণতি), আমরা 8টি ফিল্টারে অত্যন্ত সুনির্দিষ্ট "RtDR জিন" সনাক্ত করে SARS-CoV-2 ভাইরাল RNA-এর উপস্থিতি যুক্তিসঙ্গতভাবে প্রদর্শন করেছি বলে নিশ্চিত করতে পারি।যাইহোক, ফিল্টারগুলি থেকে অতিরিক্ত উপকরণের অভাবের কারণে, আমরা একসাথে 3টি আণবিক চিহ্নিতকারীর জন্য ইতিবাচকতা দেখানোর জন্য পর্যাপ্ত সংখ্যক পরীক্ষার পুনরাবৃত্তি করতে পারিনি।
এটিই প্রথম প্রাথমিক প্রমাণ যে SARS-CoV-2 RNA বহিরঙ্গন কণা পদার্থে উপস্থিত থাকতে পারে, এইভাবে পরামর্শ দেয় যে, বায়ুমণ্ডলীয় স্থিতিশীলতা এবং PM-এর উচ্চ ঘনত্বের পরিস্থিতিতে, SARS-CoV-2 আউটডোর PM সহ ক্লাস্টার তৈরি করতে পারে এবং - দ্বারা তাদের বিচ্ছুরণ সহগ হ্রাস করা - বায়ুমণ্ডলে ভাইরাসের স্থায়ীত্ব বৃদ্ধি করে।এই প্রাথমিক আরও নিশ্চিতকরণপ্রমাণগুলি চলমান রয়েছে, এবং SARS-CoV-2 এর জীবনীশক্তি সম্পর্কে বাস্তব-সময়ের মূল্যায়ন অন্তর্ভুক্ত করা উচিত এবং সেইসাথে কণা পদার্থে শোষিত হওয়ার সময় এটির ভাইরাস।বর্তমানে, PM-এ ভাইরাসের উপস্থিতি এবং COVID-19 প্রাদুর্ভাবের অগ্রগতির মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক সম্পর্কে কোনও অনুমান করা যায় না।বিশেষভাবে সম্বোধন করা অন্যান্য সমস্যা হল শেষ পর্যন্ত PM এর গড় ঘনত্বসংক্রামনের সম্ভাব্য "বুস্ট ইফেক্ট" এর জন্য প্রয়োজনীয় (যদি এটা নিশ্চিত করা হয় যে PM ভাইরাল ড্রপলেট নিউক্লিয়াসের জন্য "বাহক" হিসাবে কাজ করতে পারে), অথবা এমনকি PM এর নিম্ন প্রান্তিকে ন্যূনতম ডোজ এক্সপোজারের ফলে ইমিউনাইজেশনের তাত্ত্বিক সম্ভাবনা .

চিত্র.1 E (A) এবং RdRP জিন (B) এর পরিবর্ধন বক্ররেখা: সবুজ রেখাগুলি পরীক্ষিত ফিল্টারগুলিকে প্রতিনিধিত্ব করে;ক্রস লাইনরেফারেন্স ফিল্টার নিষ্কাশন প্রতিনিধিত্ব করে;লাল রেখাগুলি ইতিবাচক নমুনার পরিবর্ধনের প্রতিনিধিত্ব করে।
আকার 1

চিত্র 2।সমস্ত 34 PM10 নমুনার জন্য প্রাপ্ত E, N এবং RdRP জিনের জন্য ইতিবাচক ফলাফল (X দিয়ে চিহ্নিত)ফিল্টারগুলি দ্বিতীয় সমান্তরাল বিশ্লেষণে পরীক্ষিত।
চিত্র 2Leonardo Setti1, Fabrizio Passarini2, Gianluigi De Gennaro3, Pierluigi Barbieri4, Maria Grazia Perrone5, Massimo Borelli6, Jolanda Palmisani3, Alessia Di Gilio3, Valentina Torboli6, Alberto Pallavicini6, Maurizio Priscoit, Mico, 898, 98
1. ডিপার্টমেন্ট ইন্ডাস্ট্রিয়াল কেমিস্ট্রি, ইউনিভার্সিটি অফ বোলোগনা, Viale del Risorgimento – 4, I-40136, Bologna, Italy
e-mail: leonardo.setti@unibo.it
2. শিল্প গবেষণার জন্য আন্তঃবিভাগীয় কেন্দ্র "নবায়নযোগ্য উত্স, পরিবেশ, নীল বৃদ্ধি, শক্তি",
University of Bologna, Rimini, Italy e-mail: fabrizio.passarini@unibo.it
3. জীববিজ্ঞান বিভাগ, বারি, বারি, ইতালির বিশ্ববিদ্যালয় "আলডো মোরো"
e-mail: gianluigi.degennaro@uniba.it; alessia.digilio@uniba.it; jolanda.palmisani@uniba.it
4. রাসায়নিক ও ফার্মাসিউটিক্যাল সায়েন্স বিভাগ, ট্রিয়েস্ট বিশ্ববিদ্যালয়, ট্রিয়েস্ট, ইতালি
e-mail: barbierp@units.it
5. পরিবেশ গবেষণা বিভাগ, TCR TECORA, মিলান, ইতালি
e-mail: mariagrazia.perrone@tcrtecora.com
6. জীবন বিজ্ঞান বিভাগ - ট্রিয়েস্ট বিশ্ববিদ্যালয়, ট্রিয়েস্ট, ইতালি
e-mail: borelli@units.it; torboli@units.it; pallavic@units.it
7. ল্যাবরেটরি মেডিসিন বিভাগ, ইউনিভার্সিটি হাসপাতাল গিউলিয়ানো ইসোন্টিনা (এএসইউ জিআই), ট্রিস্টে, ইতালি
email: maurizio.ruscio@asugi.sanita.fvg.it
8. ইতালিয়ান সোসাইটি অফ এনভায়রনমেন্টাল মেডিসিন (সিমা), মিলান, ইতালি
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
9. পরিবেশ বিজ্ঞান এবং নীতি বিভাগ, মিলান বিশ্ববিদ্যালয়, মিলান, ইতালি
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
সংশ্লিষ্ট লেখক:
লিওনার্দো সেত্তি, Department of Industrial Chemistry, University of Bologna Viale del Risorgimento 4, 40136, Bologna, Italy; e-mail: leonardo.setti@unibo.it

তথ্যসূত্র
1. বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা, COVID-19 সৃষ্টিকারী ভাইরাসের সংক্রমণের পদ্ধতি: IPC সতর্কতা সুপারিশের প্রভাব, বৈজ্ঞানিক সংক্ষিপ্ত;এখানে উপলব্ধ: https://www.who.int/newsroom/commentaries/detail/modes-of-transmission-of-virus-causing-covid-19-implications-for-ipcprecaution-recommendations (29 মার্চ 2020)
2. ইতালির স্বাস্থ্য মন্ত্রণালয়, ইতালিতে কোভিড-19 প্রাদুর্ভাবের দৈনিক বুলেটিন, http://www.salute.gov.it/imgs/C_17_notizie_4451_0_file.pdf-এ উপলব্ধ
3. EEA, ইউরোপিয়ান এনভায়রনমেন্টাল এজেন্সি, ইউরোপ 2019 রিপোর্টে বায়ুর গুণমান;নং 10/2019;ইউরোপীয় পরিবেশ সংস্থা: কোপেনহেগেন, ডেনমার্ক, এখানে পাওয়া যাবে: https://www.eea.europa.eu/publications/airquality-in-europe-2019
4. Xiao Wu, Rachel C. Nethery, M. Benjamin Sabath, Danielle Braun, Francesca Dominici, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বায়ু দূষণ এবং COVID-19 মৃত্যুহার, এখানে উপলব্ধ: https://projects.iq.harvard.edu/ files/covid-pm/files/pm_and_covid_mortality.pdf
5. ইতালীয় সোসাইটি অফ এনভায়রনমেন্টাল মেডিসিন (সিমা), পজিশন পেপার পার্টিকুলেট ম্যাটার এবং COVID-19,
এখানে উপলব্ধ: http://www.simaonlus.it/wpsima/wp-content/uploads/2020/03/COVID_19_positionpaper_ENG.pdf
6. সেত্তি এল., প্যাসারিনি এফ., ডি গেন্নারো জি., বারবিয়েরি পি., পেরোন এমজি, পিয়াজ্জালুঙ্গা এ., বোরেলি এম., পালমিসানি জে., ডি গিলিও এ, পিসিটেলি পি, মিয়ানি এ., একটি প্রশংসনীয় ভূমিকা আছে কি? উত্তর ইতালিতে COVID-19 ছড়িয়ে পড়ার ক্ষেত্রে কণার জন্য?, BMJ র‌্যাপিড রেসপন্স, 8ই এপ্রিল 2020, এখানে উপলব্ধ: https://www.bmj.com/content/368/bmj.m1103/rapid-responses
7. Sedlmaier, N., Hoppenheidt, K., Krist, H., Lehmann, S., Lang, H., Buttner, M. জেনারেশন অফ এভিয়ান ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাস (AIV) দূষিত মল সূক্ষ্ম কণা পদার্থ (PM2.5): জিনোম এবং সংক্রামকতা সনাক্তকরণ এবং ইমিশনের গণনা।ভেটেরিনারি মাইক্রোবায়োলজি।139, 156-164 (2009)
8. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. এয়ারবর্ন ট্রান্সমিশন 2015 সালে অত্যন্ত প্যাথোজেনিক এভিয়ান ইনফ্লুয়েঞ্জা প্রাদুর্ভাবের বিস্তারে ভূমিকা পালন করতে পারে যুক্তরাষ্ট্র.বিজ্ঞান প্রতিনিধি 9, 11755। https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
9. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. পশ্চিম চীনে হামের ঘটনার উপর ধূলিকণার প্রভাবের জন্য মূল্যায়ন।বায়ুমণ্ডলীয় পরিবেশ।157, 1-9 (2017)
10. সোরেনসেন, জেএইচ, ম্যাকে, ডিকেজে, জেনসেন, সি. Ø., ডোনাল্ডসন, এআই একটি সমন্বিত মডেল যা পা-ও-মুখ রোগের ভাইরাস এপিডেমিওলের বায়ুমণ্ডলীয় বিস্তারের পূর্বাভাস দেয়।সংক্রমিত।, 124, 577-590 (2000)
11. Glostera, J., Alexandersen, S. New Directions: Airborne Transmission of Foot-and-Mouth Disease Virus Atmospheric Environment, 38 (3), 503-505 (2004)
12. Reche, I., D'Orta, G., Mladenov, N., Winget, DM, Suttle, CA বায়ুমণ্ডলীয় সীমানা স্তরের উপরে ভাইরাস এবং ব্যাকটেরিয়ার জমার হার।আইএসএমই জার্নাল।12, 1154-1162 (2018)
13. কিন, এন., লিয়াং, পি., উ, সি., ওয়াং, জি., জু, কিউ., জিয়াং, এক্স., ওয়াং, টি., জোলফো, এম., সেগাটা, এন., কিন, এইচ ., নাইট, আর., গিলবার্ট, জেএ, ঝু, একটি মেগাসিটিতে কণা পদার্থের সাথে যুক্ত মাইক্রোবায়োমের অনুদৈর্ঘ্য জরিপ।জিনোম বায়োলজি।21, 55 (2020)
14. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. Airborne ট্রান্সমিশন থাকতে পারে
মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে 2015 এর উচ্চ প্যাথোজেনিক এভিয়ান ইনফ্লুয়েঞ্জা প্রাদুর্ভাবের বিস্তারে ভূমিকা পালন করেছে।বিজ্ঞান
রিপ্র. 9, 11755। https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
15. Ma, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. পশ্চিম চীনে হামের ঘটনাতে ধূলিকণার প্রভাবের জন্য মূল্যায়ন।বায়ুমণ্ডলীয় পরিবেশ।157, 1-9 (2017)
16. জিয়াং, ডব্লিউ., লাইং, পি., ওয়াং, বি., ফ্যাং, জে., ল্যাং, জে., তিয়ান, জি., জিয়াং, জে., ঝু, টিএফ অপ্টিমাইজড ডিএনএ নিষ্কাশন এবং বায়ুবাহিত মাইক্রোবায়াল সম্প্রদায়ের মেটাজেনমিক সিকোয়েন্সিং .নাট।প্রোটোক10, 768-779 (2015)
17. প্যান, এম, লেডনিকি, JA, Wu, C.-Y., সংগ্রহ, কণার আকার এবং বায়ুবাহিত ভাইরাস সনাক্তকরণ।ফলিত মাইক্রোবায়োলজির জার্নাল, 127, 1596-1611 (2019)
18. Zymoresearch Ldt, পণ্যের বিবরণ, এখানে উপলব্ধ: https://www.zymoresearch.com/products/quick-rnafecal-soil-microbe microprep-kit
19. Quantabio Ltd, পণ্যের বর্ণনা, এখানে উপলব্ধ: https://www.quantabio.com/qscript-xlt-1-steprt-qpcr-toughmix
20. Corman, VM, Landt, O., Kaiser, M., Molenkamp, ​​R., Meijer, A., Chu, DK, & Mulders, DG (2020)।
রিয়েল-টাইম RT-PCR দ্বারা 2019 নভেল করোনাভাইরাস (2019-nCoV) সনাক্তকরণ।Eurosurveillance, 25(3), এখানে উপলব্ধ:.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6988269/

মূল: https://doi.org/10.1101/2020.04.15.20065995


পোস্টের সময়: এপ্রিল-18-2020